2×PCR मास्टर मिक्स (डाईशिवाय)
पीसीआर मास्टर मिक्स हे एक प्रकारचे पारंपारिक पीसीआर प्रिमिक्स्ड सोल्यूशन आहे जे वापरण्यासाठी तयार आहे, ज्यात Taq DNA पॉलिमरेझ, dNTP मिक्स MgCl2 आणि ऑप्टिमाइझ्ड बफर यांचा समावेश आहे.प्रतिक्रियेदरम्यान, प्रवर्धनासाठी केवळ प्राइमर आणि टेम्पलेट जोडले जाऊ शकतात, जे प्रयोगाच्या ऑपरेशन चरणांना मोठ्या प्रमाणात सुलभ करते.या उत्पादनामध्ये उत्कृष्ट स्टॅबिलायझर्स आहेत आणि 4℃ तापमानात 3 महिन्यांसाठी साठवले जाऊ शकतात.पीसीआर उत्पादनामध्ये 3′-dA प्रोट्र्यूजन असते आणि ते टी वेक्टरमध्ये सहजपणे क्लोन केले जाऊ शकते.
स्टोरेज अटी
उत्पादन दोन वर्षांसाठी -25℃~-15℃ वर साठवले पाहिजे.
तपशील
निष्ठा (वि. Taq) | 1× |
हॉट स्टार्ट | No |
ओव्हरहँग | ३′-अ |
पॉलिमरेज | Taq DNA पॉलिमरेझ |
प्रतिक्रिया स्वरूप | सुपरमिक्स किंवा मास्टर मिक्स |
प्रतिक्रिया गती | मानक |
उत्पादन प्रकार | पीसीआर मास्टर मिक्स (2×) |
सूचना
१.प्रतिक्रिया प्रणाली
घटक | आकार (μL) |
टेम्पलेट डीएनए | सुयोग्य |
प्राइमर 1 (10 μmol/L) | 2 |
प्राइमर 2 (10 μmol/L) | 2 |
पीसीआर मास्टर मिक्स | 25 |
ddH2O | 50 पर्यंत |
2.प्रवर्धन प्रोटोकॉल
सायकल पायऱ्या | तापमान (°C) | वेळ | सायकल |
प्री-डिनेच्युरेशन | 94 ℃ | ५ मिनिटे | 1 |
विकृतीकरण | 94 ℃ | ३० से | 35 |
एनीलिंग | 50-60 ℃ | ३० से | |
विस्तार | 72 ℃ | 30-60से/केबी | |
अंतिम विस्तार | 72 ℃ | 10 मिनिटे | 1 |
टिपा:
1) टेम्पलेट वापर: 50-200 एनजी जीनोमिक डीएनए;0.1- 10 एनजी प्लास्मिड डीएनए.
2) मिग्रॅ2+एकाग्रता: या उत्पादनामध्ये 3 mM MgCl2 बहुतेक पीसीआर प्रतिक्रियांसाठी योग्य आहे.
3) एनीलिंग तापमान: कृपया प्राइमर्सच्या सैद्धांतिक टीएम मूल्याचा संदर्भ घ्या.ॲनिलिंग तापमान प्राइमरच्या सैद्धांतिक मूल्यापेक्षा 2-5 ℃ कमी सेट केले जाऊ शकते.
4) विस्तार वेळ: आण्विक ओळखीसाठी, 30 सेकंद/kb शिफारसीय आहे.जीन क्लोनिंगसाठी, 60sec/kb ची शिफारस केली जाते.
नोट्स
१.तुमच्या सुरक्षिततेसाठी आणि आरोग्यासाठी, कृपया ऑपरेशनसाठी लॅब कोट आणि डिस्पोजेबल हातमोजे घाला.
2.फक्त संशोधनासाठी वापरा!