पेरोक्सिडेस (तिखट मूळ असलेले एक रोपटे स्त्रोत) समानार्थी शब्द: हायड्रोजन पेरोक्साइड ऑक्सिडोरेक्टेस;एचआरपी
वर्णन
तिखट मूळ असलेले एक रोपटे पेरोक्सिडेस (HRP) तिखट मूळ असलेले एक रोपटे (Amoracia rusticana) च्या मुळांपासून वेगळे केले जाते आणि पेरोक्सिडेसेसच्या फेरोप्रोटोपोर्फिरिन गटाशी संबंधित आहे.HRP सहज हायड्रोजन पेरॉक्साइड (H2O2) सह एकत्रित होते.परिणामी [HRP-H2O2] कॉम्प्लेक्स विविध प्रकारचे हायड्रोजन दातांचे ऑक्सीकरण करू शकते:
दाता + H2O2 → ऑक्सिडाइज्ड डोनर + 2 H2O
एचआरपी विविध सब्सट्रेट्स ऑक्सिडाइज करेल (तक्ता 1 पहा):
• क्रोमोजेनिक
• केमिल्युमिनेसेंट (जसे की ल्युमिनॉल किंवा आयसोल्युमिनॉल)
• फ्लोरोजेनिक (जसे की टायरामाइन, होमोव्हॅनिलिक ऍसिड किंवा 4-हायड्रॉक्सीफेनिल ऍसिटिक ऍसिड)
एचआरपी हे सिंगल चेन पॉलीपेप्टाइड आहे ज्यामध्ये चार डायसल्फाइड ब्रिज असतात.HRP एक ग्लायकोप्रोटीन आहे ज्यामध्ये 18% कार्बोहायड्रेट असते.कर्बोदकांमधे विशिष्ट आयसोझाइमवर अवलंबून गॅलेक्टोज, अरेबिनोज, झायलोज, फ्यूकोज, मॅनोज, मॅनोसामाइन आणि गॅलेक्टोसामाइन यांचा समावेश होतो.
HRP हे इम्युनोब्लोटिंग, इम्युनोहिस्टोकेमिस्ट्री आणि ELISA यासह अनेक वेगवेगळ्या इम्युनोकेमिस्ट्री ऍप्लिकेशन्समध्ये इम्युनोग्लोबुलिनसाठी मोठ्या प्रमाणावर वापरले जाणारे लेबल आहे.ग्लुटाराल्डिहाइड, पीरियडेट ऑक्सिडेशन, डायसल्फाइड बॉण्ड्स आणि एमिनो आणि थिओल डायरेक्ट क्रॉस-लिंकर्ससह अनेक वेगवेगळ्या पद्धतींनी एचआरपी अँटीबॉडीजशी जोडले जाऊ शकते.एचआरपी हे प्रतिपिंडांसाठी सर्वात इच्छित लेबल आहे, कारण ते तीन सर्वात लोकप्रिय एन्झाइम लेबलांपैकी सर्वात लहान आणि सर्वात स्थिर आहे (पेरोक्सिडेस, β-गॅलॅक्टोसिडेस, अल्कलाइन फॉस्फेट) आणि त्याचे ग्लायकोसिलेशन कमी गैर-विशिष्ट बंधनास कारणीभूत ठरते.ग्लुटाराल्डिहाइड आणि पीरियडेट संयुग्मन पद्धतींचे पुनरावलोकन प्रकाशित केले गेले आहे.
पेरोक्सिडेसचा वापर द्रावणातील ग्लुकोज 4 आणि पेरोक्साइड्सचे निर्धारण करण्यासाठी देखील केला जातो.अनेक प्रकाशने, 6-24 प्रबंध, 25-29 आणि प्रबंध 30-46 यांनी त्यांच्या संशोधन प्रोटोकॉलमध्ये P8375 चा वापर उद्धृत केला आहे.
रासायनिक रचना
तपशील
चाचणी आयटम | तपशील |
वर्णन | लाल-तपकिरी आकारहीन पावडर, lyophilized |
क्रियाकलाप | ≥100U/mg |
शुद्धता(SDS-PAGE) | ≥९०% |
विद्राव्यता (10 मिग्रॅ पावडर/मिली) | साफ |
एन्झाइम्स दूषित करणे | |
NADH/NADPH ऑक्सिडेस | ≤0.1% |
Catalase | ≤0.005% |
ATPase | ≤0.03% |
वाहतूक आणि स्टोरेज
वाहतूक:2-8°C खाली पाठवले
स्टोरेज:-20°C (दीर्घकालीन), 2-8°C (अल्पकालीन) वर साठवा
पुन्हा चाचणीची शिफारस केलीजीवन:2 वर्ष