फॉस्फेट अल्कलाइन (ALP)
वर्णन
क्षारीय फॉस्फेटस हे TAB5 जनुक वाहून नेणाऱ्या E. coli स्ट्रेनपासून बनवले जाते.एंझाइम DNA आणि RNA फॉस्फोमोनोएस्टर्सच्या 5´ आणि 3´ टोकांचे डिफॉस्फोरिलेशन उत्प्रेरित करते.तसेच, ते राइबोज, तसेच डीऑक्सीरिबोन्यूक्लिओसाइड ट्रायफॉस्फेट्स (NTPs आणि dNTPs) हायड्रोलायझ करते.TAB5 अल्कलाइन फॉस्फेटेस 5´ पसरलेल्या, 5´ मागे पडलेल्या आणि बोथट टोकांवर कार्य करते.फॉस्फेटेसचा वापर अनेक आण्विक जीवशास्त्र अनुप्रयोगांमध्ये केला जाऊ शकतो, जसे की डीएनए किंवा आरएनएचे फॉस्फोरीलेटेड टोक काढून टाकण्यासाठी क्लोनिंग किंवा प्रोब एंड लेबलिंग.क्लोनिंग प्रयोगांमध्ये, डिफॉस्फोरिलेशन रेखीय प्लाझमिड डीएनएला स्व-बंधनापासून प्रतिबंधित करते.डीएनए अनुक्रमणासाठी टेम्पलेट तयार करण्यासाठी ते पीसीआर प्रतिक्रियांमध्ये असंघटित डीएनटीपी देखील कमी करू शकते.5 मिनिटे 70 डिग्री सेल्सिअस तापमानात गरम केल्याने एन्झाईम पूर्णपणे आणि अपरिवर्तनीयपणे निष्क्रिय होते, ज्यामुळे फॉस्फेटला बंधनापूर्वी काढून टाकणे किंवा शेवटचे लेबलिंग अनावश्यक होते.
वापर
1. क्षारीय फॉस्फेटस प्रथिनांशी जोडलेले (अँटीबॉडीज, स्ट्रेप्टाव्हिडिन इ.) विशेषत: लक्ष्य रेणू ओळखू शकतात आणि ELISA, WB आणि हिस्टोकेमिकल डिटेक्शनमध्ये वापरले जाऊ शकतात;
2. अल्कलाइन फॉस्फेटचा वापर डीएनए किंवा आरएनएच्या 5'-टर्मिनलला सेल्फ-लिंकिंग टाळण्यासाठी डिफॉस्फोराइज करण्यासाठी केला जाऊ शकतो;
3. वरील dephosphorylated DNA किंवा RNA रेडिओ-लेबल केलेल्या फॉस्फेट्सद्वारे लेबल केले जाऊ शकतात (T4 पॉली-न्यूक्लियोटाइड किनेजद्वारे)
रासायनिक रचना
तपशील
चाचणी आयटम | तपशील |
एंजाइम क्रियाकलाप | 5U/μL |
एंडोन्यूक्लीज क्रियाकलाप | आढळले नाही |
Exonuuclease क्रियाकलाप | आढळले नाही |
Nicking क्रियाकलाप | आढळले नाही |
RNase क्रियाकलाप | आढळले नाही |
E.coli DNA | ≤1copy/5U |
एंडोटॉक्सिन | LAL-चाचणी, ≤10EU/mg |
पवित्रता | ≥95% |
वाहतूक आणि स्टोरेज
वाहतूक:सभोवतालचा
स्टोरेज:2-8°C वर साठवा
पुन्हा चाचणीची शिफारस केलीजीवन:2 वर्ष