RT-LAMP कलरमेट्रिक मास्टर मिक्स HCB5204A
या उत्पादनामध्ये रिॲक्शन बफर, RT-एंझाइम्स मिक्स (Bst DNA पॉलिमरेज आणि उष्णता-प्रतिरोधक रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस), लायओफिलाइज्ड प्रोटेक्टंट्स आणि क्रोमोजेनिक डाई घटक आहेत.वापरण्यासाठी, फक्त बफर वापरा, प्रतिक्रिया एन्झाइम आणि प्राइमर मिश्रित आणि टेम्पलेटमध्ये जोडले जातात;lyophilized संरक्षक जोडणे सरळ असू शकते.ते लायओफिलायझरशी जोडलेले होते आणि लिओफिलाइज्ड होते आणि वापरताना केवळ प्राइमर्स आणि टेम्पलेट जोडले गेले होते.हे किट प्रवर्धनाची जलद, स्पष्ट व्हिज्युअल ओळख प्रदान करते, जी नकारात्मक प्रतिक्रिया लाल रंगात दर्शविली जाते आणि सकारात्मक प्रतिक्रिया पिवळ्या रंगात बदलून दर्शविली जाते.
घटक
| घटक | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| लूप-मध्यस्थ प्रवर्धन बफर (रंगासह) | 0.96 मिली | 4.80 mL×2 | 9.60 mL×10 |
| RT-एंझाइम मिक्स | 270 μL | 2.70 मिली | 2.70 mL×10 |
| Lyophilized संरक्षक | 0.96 mL×2 | 9.60 mL×2 | 9.60 mL×20 |
अर्ज
डीएनए किंवा आरएनए समतापीय प्रवर्धनासाठी.
स्टोरेज अटी
कोरड्या बर्फासह वाहतूक, -25~ -15℃ वर संग्रहित.वारंवार फ्रीझ-थॉ टाळा, उत्पादन 12 महिन्यांसाठी वैध आहे.
प्रोटोकॉल
1.खोलीच्या तपमानावर वापरण्यासाठी प्रतिक्रिया बफर वितळवा.नख मिसळण्यासाठी अनेक वेळा व्होर्टेक्स किंवा उलटा करा, नंतर ट्यूबच्या तळाशी द्रव गोळा करण्यासाठी सेंट्रीफ्यूज करा.
2.प्रतिक्रिया प्रणालीची तयारी.हे अभिकर्मक दोन प्रतिक्रिया प्रणालींमध्ये तयार केले जाऊ शकते, द्रव प्रतिक्रिया मिश्रण आणि लिओफिलाइज्ड सिस्टम मिक्स.
1) द्रव प्रतिक्रिया मिश्रण तयार करा
| घटक | खंड |
| लूप-मध्यस्थ प्रवर्धन बफर (रंगासह) | 10 μL |
| RT-एंझाइम मिक्स | 2.8 μL |
| 10 × प्राइमर मिक्सa | 5 μL |
| टेम्पलेट DNA/RNA b | × μL |
| न्यूक्लीज मुक्त पाणी | 50 μL पर्यंत |
2) Lyophilization प्रणाली मिश्रण
① लिओफिलाइज्ड मिश्रण तयार करा
| घटक | खंड |
| लूप-मध्यस्थ प्रवर्धन बफर (रंगासह) | 10 μL |
| Lyophilized संरक्षक | 20 μL |
| RT-एंझाइम मिक्स | 2.8 μL |
| न्यूक्लीज मुक्त पाणी | 50 μL पर्यंत |
② लियोफिलायझेशन: तयार केलेले मिश्रण 50μL प्रणालीमध्ये लायफिलायझेशन केले गेले
③ प्रतिक्रिया मिश्रण तयार करा
| घटक | खंड |
| Lyophilized मिश्रण | 1 तुकडा |
| 10 × प्राइमर मिक्सa | 5 μL |
| टेम्पलेट DNA/RNA b | × μL |
| न्यूक्लीज मुक्त पाणी | 50 μL पर्यंत |
टिपा:
1) अ.10×प्राइमर मिक्स : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM लूप F/B;
2) बी.न्यूक्लिक ॲसिड टेंपलसाठी DEPC (पाण्यात विरघळणारी) शिफारस केली जाते.
1.30-45 मिनिटांसाठी 65°C वर उष्मायन करा, जे रंग बदलण्याच्या प्रतिक्रियेच्या वेळेनुसार योग्यरित्या वाढवता येते.
2.उघड्या डोळ्यांनुसार, पिवळा सकारात्मक आणि लाल नकारात्मक होता.
नोट्स
1.बफर ट्यूबच्या तळाशी मीठ दिसू शकते, खोलीच्या तपमानावर पूर्णपणे मिसळण्यासाठी थोड्या वेळाने भोवरा किंवा नळ्या अनेक वेळा उलटा.
2.प्राइमर्सच्या स्थितीनुसार प्रतिक्रिया तापमान 62 ℃ आणि 68 ℃ दरम्यान ऑप्टिमाइझ केले जाऊ शकते.
3.पॅकेज केलेले अभिकर्मक जास्त काळ हवेच्या संपर्कात नसावेत.
4.लाल आणि पिवळ्या रंगाची विकृती प्रतिक्रिया प्रणालीच्या pH बदलावर अवलंबून असते, कृपया ddH वापरण्यासाठी शिफारस केलेले ट्रिस न्यूक्लिक ॲसिड स्टोरेज सोल्यूशन वापरू नका2O संग्रहित न्यूक्लिक ॲसिड;
5.प्रयोग प्रमाणित असावा, ज्यामध्ये प्रतिक्रिया प्रणालीची तयारी, लिओफिलायझेशन आणि नमुना प्रक्रिया आणि नमुना जोडण्याची प्रक्रिया समाविष्ट आहे;
6.दूषित होण्यापासून टाळण्यासाठी, अल्ट्रा-क्लीन बेंचमध्ये प्रतिक्रिया प्रणाली तयार करण्याची शिफारस केली जाते, इतर ठिकाणी खोटे सकारात्मक हस्तक्षेप टाळण्यासाठी खोलीच्या फ्युम हूडमध्ये टेम्पलेट्स जोडा.
