2×HiF Taq प्लस मास्टर मिक्स
मांजर क्रमांक: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (With Dye) हे 2×प्रीमिक्स्ड सोल्यूशन वापरण्यास तयार आहे ज्यामध्ये प्लस HIF DNA पॉलिमरेज, dNTPs आणि ऑप्टिमाइझ केलेले बफर आहे.खोलीच्या तपमानावर दोन मोनोक्लोनल ऍन्टीबॉडीज जे पॉलिमरेझ क्रियाकलाप आणि 3′→5′एक्सोन्युक्लिझ क्रियाकलाप रोखतात ते सहजपणे आणि अत्यंत विशिष्ट हॉट स्टार्ट पीसीआरसाठी मास्टर मिक्समध्ये जोडले जातात.एन्झाईमला लांब तुकडा प्रवर्धन क्षमता देण्यासाठी मास्टर मिक्समध्ये विस्तार घटक जोडला जातो, प्रवर्धनाची लांबी 13 kb पर्यंत असू शकते, एन्झाइममध्ये 5′→3′ DNA पॉलिमरेज क्रियाकलाप आणि 3′→5′ असतो. exonuclease क्रियाकलाप, त्याची निष्ठा Taq DNA पॉलिमरेझच्या 83 पट आहे, जी सामान्य DNA पॉलिमरेझच्या 9 पट आहे.हे जटिल टेम्पलेट्सच्या प्रवर्धनासाठी योग्य आहे, प्रवर्धन उत्पादन एक बोथट शेवट आहे.
2×HIF Taq प्लस मास्टर मिक्स (डायसह) मध्ये जलद आणि सुलभ, उच्च संवेदनशीलता, मजबूत विशिष्टता, चांगली स्थिरता इत्यादी फायदे आहेत, प्रतिक्रिया प्रणालीला फक्त प्राइमर्स आणि टेम्पलेट्स जोडणे आवश्यक आहे आणि दोन-द्वारे वाढविले जाऊ शकते. स्टेप प्रोटोकॉल, प्रायोगिक पायऱ्या सुलभ करणे आणि वेळेची बचत करणे.या उत्पादनामध्ये इलेक्ट्रोफोरेसीस इंडिकेटर रंग आहेत आणि पीसीआर उत्पादने इलेक्ट्रोफोरेसीससाठी थेट वापरली जाऊ शकतात.याव्यतिरिक्त, उत्पादनामध्ये विशिष्ट संरक्षणात्मक एजंट देखील समाविष्ट आहे, ज्यामुळे मास्टर मिक्स वारंवार फ्रीझ-थॉ केल्यानंतर स्थिर क्रियाकलाप राखू शकेल.
स्टोरेज अटी
उत्पादने 1 वर्षासाठी -25~-15℃ वर साठवली पाहिजेत.
तपशील
उत्पादन तपशील | मास्टर मिक्स |
एकाग्रता | 2× |
हॉट स्टार्ट | अंगभूत हॉट स्टार्ट |
ओव्हरहँग | बोथट |
प्रतिक्रिया गती | जलद |
आकार (अंतिम उत्पादन) | 13kb पर्यंत |
वाहतुकीसाठी अटी | शुष्क बर्फ |
उत्पादन प्रकार | उच्च निष्ठा पीसीआर प्रीमिक्स |
सूचना
१.पीसीआर प्रतिक्रिया प्रणाली
घटक | व्हॉल्यूम (μL) |
डीएनए टेम्पलेट | सुयोग्य |
फॉरवर्ड प्राइमर (10 μmol/L) | २.५ |
रिव्हर्स प्राइमर (10 μmol/L) | २.५ |
2×HIF Taq प्लस मास्टर मिक्स | 25 |
ddH2O | 50 पर्यंत |
2.वेगवेगळ्या टेम्पलेट्सचा वापर करण्याची शिफारस केली जाते
टेम्पलेटचा प्रकार | 1kb ते 10 kb पर्यंतचे तुकडे वाढवा |
जीनोमिक डीएनए | 50 एनजी-200 एनजी |
प्लाझमिड किंवा व्हायरल डीएनए | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 μL (अंतिम पीसीआर प्रतिक्रिया व्हॉल्यूमच्या 10% पेक्षा जास्त नाही) |
3.प्रवर्धन प्रोटोकॉल
1) द्वि-चरण प्रोटोकॉल (जटिल टेम्पलेट)
सायकल पायरी | टेंप. | वेळ | सायकल |
प्रारंभिक विकृतीकरण | 98℃ | 3 मि | 1 |
विकृतीकरण | 98℃ | 10से | 30-35 |
विस्तार | 68℃ | 30 सेकंद/kb | |
अंतिम विस्तार | 72℃ | ५ मि | 1 |
२) तीन-चरण प्रोटोकॉल (नियमित प्रोटोकॉल)
सायकल पायरी | टेंप. | वेळ | सायकल |
प्रारंभिक विकृतीकरण | 98℃ | 3 मि | 1 |
विकृतीकरण | 98℃ | 10से | 30-35 |
एनीलिंग | 60℃ | 20 से | |
विस्तार | 72℃ | 30 सेकंद/kb | |
अंतिम विस्तार | 72℃ | ५ मि | 1 |
3) एनीलिंग ग्रेडियंट प्रोटोकॉल (जटिलता टेम्पलेट)
सायकल पायरी | तापमान | वेळ | सायकल |
प्रारंभिक विकृतीकरण | 98℃ | 3 मि | 1 |
विकृतीकरण | 98℃ | 10 से | १५ (प्रति सायकल 1℃ कपात) |
ग्रेडियंट ॲनिलिंग | 70-55℃ | 20 से | |
विस्तार | 72℃ | 30 सेकंद/kb | |
विकृतीकरण | 98℃ | 10 से |
20 |
एनीलिंग | 55℃ | 20 से | |
विस्तार | 72℃ | 30 सेकंद/kb | |
अंतिम विस्तार | 72℃ | ५ मि | 1 |
भिन्न प्रवर्धन प्रोटोकॉल अंतर्गत वैशिष्ट्ये
प्रोटोकोl | दोन-चरण | तीन-चरण | ग्रेडियंट ॲनिलिंग |
तपशील. | जलद | मध्यम | मंद |
विशिष्टता | उच्च | मध्यम | उच्च |
पीसीआर उत्पन्न | मध्यम | उच्च | मध्यम |
शोध दर | उच्च | मध्यम | उच्च |
नोट्स
तुमचे आरोग्य आणि सुरक्षितता सुनिश्चित करण्यासाठी कृपया आवश्यक पीपीई, लॅब कोट आणि हातमोजे घाला!