रानसे ए
Ribonuclease A (RNaseA) हे एकल-स्ट्रँडेड पॉलीपेप्टाइड आहे ज्यामध्ये सुमारे 13.7 kDa च्या आण्विक वजनासह 4 डायसल्फाइड बंध असतात.RNase A हे एंडोरिबोन्यूक्लीज आहे जे विशेषतः C आणि U अवशेषांवर सिंगल-स्ट्रँडेड RNA कमी करते.विशेषत:, क्लीवेज न्यूक्लियोटाइडच्या 5′-राइबोज आणि फॉस्फेट गटाच्या 3′-राइबोजवरील pyrimidine न्यूक्लियोटाइडच्या फॉस्फोडिएस्टर बॉन्डला ओळखते, जेणेकरून 2, 3′-सायक्लिक फॉस्फेटस 3′-सायक्लिक हायड्रोलेझिंग 3′ ′न्यूक्लिओसाइड फॉस्फेट्स (उदा. pG-pG-pC-pA-pG RNase A द्वारे pG-pG-pCp आणि A-PG तयार करण्यासाठी क्लीव्ह केले जाते).RNase A हे सिंगल-स्ट्रँडेड RNA क्लीव्हिंगमध्ये सर्वात सक्रिय आहे.शिफारस केलेले कार्यरत एकाग्रता 1-100μG/mL आहे, विविध प्रतिक्रिया प्रणालींशी सुसंगत आहे.कमी मीठ एकाग्रता (0-100 mM NaCl) चा वापर सिंगल-स्ट्रँडेड RNA, डबल-स्ट्रँडेड RNA आणि RNA-DNA हायब्रिडायझेशनने तयार झालेल्या RNA चेन कापण्यासाठी केला जाऊ शकतो.तथापि, उच्च मीठ एकाग्रता (≥0.3 M), RNase A केवळ विशेषत: सिंगल-स्ट्रँडेड RNA क्लीव्ह करते.
प्लाझमिड DNA किंवा जीनोमिक DNA तयार करताना RNA काढण्यासाठी RNase A चा वापर सामान्यतः केला जातो. तयारी प्रक्रियेदरम्यान DNase सक्रिय आहे की नाही याचा सहज प्रतिक्रिया प्रभावित होऊ शकतो.पाण्याच्या बाथमध्ये उकळण्याची पारंपारिक पद्धत DNase क्रियाकलाप निष्क्रिय करण्यासाठी वापरली जाऊ शकते.या उत्पादनामध्ये DNase आणि प्रोटीज नसतात आणि वापरण्यापूर्वी उष्णता उपचार आवश्यक नसते.याव्यतिरिक्त, हे उत्पादन RNase संरक्षण विश्लेषण आणि RNA अनुक्रम विश्लेषण यांसारख्या आण्विक जीवशास्त्र प्रयोगांमध्ये देखील वापरले जाऊ शकते.
स्टोरेज अटी
उत्पादन -25～-15℃ वर साठवले जाऊ शकते, 2 वर्षांसाठी वैध आहे.
सूचना
RNase A स्टोरेज सोल्यूशन तयार करण्यासाठी ही एक सामान्य पद्धत आहे.द्वारे देखील तयार केले जाऊ शकतेप्रयोगशाळेतील पारंपारिक पद्धतींनुसार इतर पद्धती किंवा संदर्भ साहित्य (जसे10 mM Tris-HCl, pH 7.5 किंवा Tris-NaCl द्रावणात थेट विरघळणारे)
1. RNase A स्टोरेज सोल्यूशनचे 10 mg/mL तयार करण्यासाठी 10 mM सोडियम एसीटेट (pH 5.2) वापरा
2. 15 मिनिटांसाठी 100 ℃ वर गरम करणे
3. खोलीच्या तापमानाला थंड करा, 1 एम ट्रिस-एचसीएल (पीएच 7.4) चे 1/10 व्हॉल्यूम जोडा, त्याचा पीएच 7.4 (साठी) समायोजित कराउदाहरणार्थ, 500 ml 10g/ml RNase स्टोरेज सोल्यूशन 1M Tris-HCL, PH7.4 जोडा)
4. गोठविलेल्या स्टोरेजसाठी -20℃ वर सब-पॅक केलेले, जे 2 वर्षांपर्यंत स्थिर असू शकते.
[नोट्स]: तटस्थ परिस्थितीत RNaseA द्रावण उकळताना, RNase पर्जन्य तयार होईल;ते कमी पीएचवर उकळवा आणि जर तेथे पर्जन्यवृष्टी असेल तर ते लक्षात घेतले जाऊ शकते, जे प्रथिने अशुद्धतेच्या उपस्थितीमुळे होऊ शकते.उकळल्यानंतर गाळ आढळल्यास, हाय-स्पीड सेंट्रीफ्यूगेशन (13000rpm) द्वारे अशुद्धता काढून टाकली जाऊ शकते आणि नंतर गोठवण्याच्या स्टोरेजसाठी उप-पॅक केली जाऊ शकते.
उत्पादनाची माहिती
| समानार्थी शब्द | रिबोन्यूक्लिझ I;स्वादुपिंड ribonuclease;रिबोन्यूक्लीज ३'-pyrimidnooligonucleotidohydrolase;Rnase A;एंडोरिबोन्युलसीज I |
| CAS क्र. | 9001-99-4 |
| देखावा | पांढरा लियोफिलाइज्ड पावडर |
| आण्विक वजन | ~ 13.7kDa (अमीनो आम्ल अनुक्रम) |
| Ph मूल्य | 7.6 (क्रियाकलाप श्रेणी 6-10) |
| योग्य तापमान | 60℃ (क्रियाकलाप श्रेणी 15-70℃) |
| सक्रिय करणारा एजंट | Na2+.के+ |
| अवरोधक | Rnase इनहिबिटर |
| निष्क्रियता पद्धत | गरम करून निष्क्रिय केले जाऊ शकत नाही, सेंट्रीफ्यूज स्तंभ वापरण्याची शिफारस केली जाते |
| मूळ | बोवाइन |
| विद्राव्यता | पाण्यात विरघळणारे (10mg/ml) |
| कोरडे वर नुकसान | ≤5.0% |
| एंजाइम क्रियाकलाप | ≥60 कुनिट्झ युनिट/मिग्रॅ |
| आयसोइलेक्ट्रिक पॉइंट | ९.६ |
नोट्स
तुमच्या सुरक्षिततेसाठी आणि आरोग्यासाठी, कृपया ऑपरेशनसाठी लॅब कोट आणि डिस्पोजेबल हातमोजे घाला.
