मल्टीप्लेक्स qPCR प्रोब प्रीमिक्स
मांजर क्रमांक: HCB5051A
TaqMan मल्टिप्लेक्स qPCR मास्टर मिक्स (डाय बेस्ड) हे 2 × रिअल-टाइम परिमाणात्मक PCR ॲम्प्लीफिकेशनसाठी प्री-सोल्यूशन आहे जे उच्च संवेदनशीलता आणि विशिष्टतेद्वारे वैशिष्ट्यीकृत आहे, ज्याचा रंग निळा आहे आणि नमुना जोडण्याचा प्रभाव आहे.हे उत्पादन 2× मिक्स पूर्व-मिश्र अभिकर्मक आहे जे एका प्रतिक्रियेमध्ये चार फ्लोरोसेंट परिमाणात्मक PCR प्रतिक्रिया सक्षम करते.या उत्पादनामध्ये हॉट-स्टार्ट Taq एन्झाइमची अनुवांशिकरित्या सुधारित प्रतिपिंड पद्धत आहे, ज्यामुळे प्रवर्धन संवेदनशीलता आणि विशिष्टता मोठ्या प्रमाणात सुधारते.त्याच वेळी, या उत्पादनाने बहु-प्रतिक्रिया बफरला सखोलपणे ऑप्टिमाइझ केले आहे, जे प्रतिक्रियेची प्रवर्धन कार्यक्षमता सुधारू शकते आणि कमी-सांद्रता टेम्पलेट्सच्या प्रभावी प्रवर्धनास प्रोत्साहन देऊ शकते.हे उत्पादन जीनोटाइपिंग आणि मल्टीप्लेक्स परिमाणात्मक विश्लेषणासाठी वापरले जाऊ शकते.
तपशील
| हॉट स्टार्ट | अंगभूत हॉट स्टार्ट |
| शोध पद्धत | प्राइमर-प्रोब शोध |
| पीसीआर पद्धत | qPCR |
| पॉलिमरेज | Taq DNA पॉलिमरेज |
| नमुना प्रकार | डीएनए |
स्टोरेज अटी
उत्पादन कोरड्या बर्फाने पाठवले जाते आणि 2 वर्षांसाठी -25~-15℃ वर साठवले जाऊ शकते.
सूचना
1. प्रतिक्रियाप्रणाली
| घटक | व्हॉल्यूम (μL) | अंतिम एकाग्रता |
| 2× TaqMan मल्टिप्लेक्स qPCR मास्टर मिक्स | १२.५ | 1× |
| प्राइमर मिक्स (10 μmol/L) a | × | 0.1 - 0.5 μmol/L |
| प्रोब मिक्स (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| रॉक्स संदर्भ रंग | ०.५ | 1× |
| टेम्पलेट DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | 25 पर्यंत | - |
टिपा:जोरदार थरथरण्यापासून जास्त बुडबुडे टाळण्यासाठी वापरण्यापूर्वी पूर्णपणे मिसळा.
aप्राइमर एकाग्रता: प्राइमर मिक्समध्ये प्राइमर्सच्या अनेक जोड्या असतात, सामान्यत: प्रत्येक प्राइमर 0.2 μmol/L च्या अंतिम एकाग्रतेमध्ये असतो आणि योग्य ते 0.1 आणि 0.5 μmol/L दरम्यान समायोजित केले जाऊ शकते.
bप्रोब एकाग्रता: प्रोब मिक्समध्ये वेगवेगळ्या फ्लूरोसेन्स सिग्नलसह अनेक प्रोब असतात आणि प्रत्येक प्रोबची एकाग्रता विशिष्ट परिस्थितीनुसार 50 आणि 250 nmol/L दरम्यान समायोजित केली जाऊ शकते.
१.रॉक्स डाई संदर्भ: ते विहिरींमध्ये निर्माण झालेल्या फ्लूरोसेन्स सिग्नलची त्रुटी सुधारण्यासाठी अप्लाइड बायोसिस्टम्स सारख्या रिअल टाइम पीसीआर प्रवर्धक साधनावर वापरले जाते;या उत्पादनामध्ये Rox डाई संदर्भ नाही.आवश्यक असल्यास Cas#10200 ची शिफारस केली जाते.
2.टेम्पलेट सौम्य करणे: qPCR अत्यंत संवेदनशील आहे, आणि वापरण्यासाठी टेम्पलेट सौम्य करण्याची शिफारस केली जाते.जर टेम्पलेट सीडीएनए स्टॉक सोल्यूशन असेल, तर टेम्पलेट व्हॉल्यूम एकूण व्हॉल्यूमच्या 1/10 पेक्षा जास्त नसावा.
3.प्रतिक्रिया प्रणाली: लक्ष्य जनुक प्रवर्धनाची परिणामकारकता आणि पुनरावृत्तीक्षमता सुनिश्चित करण्यासाठी 25μL, 30μL किंवा 50 μL ची शिफारस केली जाते.
4.सिस्टम तयार करा: कृपया सुपर क्लीन बेंचमध्ये तयार करा आणि न्यूक्लीज अवशेषांशिवाय टिपा आणि प्रतिक्रिया ट्यूब वापरा;फिल्टर काडतुसेसह टिपा वापरण्याची शिफारस केली जाते.क्रॉस दूषित होणे आणि एरोसोल दूषित होणे टाळा.
2.प्रतिक्रिया कार्यक्रम
| सायकल पायरी | टेंप. | वेळ | सायकल |
| इनिशियल-डिनेच्युरेशन | 95 ℃ | ५ मिनिटे | 1 |
| विकृतीकरण | 95 ℃ | १५ से | 45 |
| एनीलिंग/विस्तार | 60 ℃ | ३०से |
टिपा:
1.एनीलिंग/विस्तार: डिझाइन केलेल्या प्राइमर टीएम मूल्यानुसार तापमान आणि वेळ योग्यरित्या समायोजित केले जाऊ शकते.
2.फ्लूरोसेन्स सिग्नल संपादन: वेगवेगळ्या qPCR डिटेक्शन उपकरणांसाठी आवश्यक असलेला फ्लूरोसेन्स सिग्नल संपादन वेळ भिन्न आहे, कृपया किमान वेळ मर्यादेनुसार सेट करा.अनेक सामान्य साधनांची वेळ खालीलप्रमाणे सेट केली आहे:
20 सेकंद: अप्लाइड बायोसिस्टम 7700, 7900HT, 7500 फास्ट
31 सेकंद: अप्लाइड बायोसिस्टम 7300
32 सेकंद: अप्लाइड बायोसिस्टम 7500
नोट्स
तुमचे आरोग्य आणि सुरक्षितता सुनिश्चित करण्यासाठी कृपया आवश्यक PPE, जसे की लॅब कोट आणि हातमोजे घाला!
