मल्टीप्लेक्स वन स्टेप RT-qPCR प्रीमिक्स-UNG
मांजर क्रमांक: HCB5145A
मल्टीप्लेक्स वन स्टेप आरटी-क्यूपीसीआर प्रोब किट (यूडीजी प्लस) हे आरएनए वर आधारित एक मल्टीप्लेक्स परिमाणात्मक पीसीआर किट आहे.प्रयोगाच्या प्रक्रियेत, रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन आणि परिमाणवाचक पीसीआर एकाच नळीमध्ये केले गेले, ज्यामुळे प्रायोगिक ऑपरेशन सुलभ झाले आणि दूषित होण्याचा धोका कमी झाला.या किटमध्ये, प्रथम स्ट्रँड सीडीएनए उष्णता-प्रतिरोधक रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेजद्वारे कार्यक्षमतेने संश्लेषित केले गेले आणि हॉटस्टार्ट टॅग डीएनए पॉलिमरेझद्वारे परिमाणात्मकरित्या वाढवले गेले.किटमध्ये प्रामुख्याने ऑप्टिमाइझ्ड एमपी बफर, एन्झाईम्स मिक्स इ. बफर सोल्यूशनमध्ये आधीपासूनच एमजी आहे2+आणि dNTP.याव्यतिरिक्त, विशिष्ट PCR प्रवर्धन प्रभावीपणे रोखू शकणारे घटक आणि एकाधिक qPCR प्रतिक्रियांची प्रवर्धन कार्यक्षमता सुधारू शकणारे घटक जोडले गेले आहेत, जे प्रवर्धन कार्यक्षमता सुनिश्चित करू शकतात आणि एकाधिक प्रवर्धन प्रतिक्रिया पार पाडू शकतात.एरोसोल दूषित होण्याचा धोका प्रभावीपणे रोखण्यासाठी dUTP/UDG प्रणाली जोडली गेली.
घटक
1. बफर
2. एन्झाइम मिक्स
तपशील
| हॉट स्टार्ट | अंगभूत हॉट स्टार्ट |
| शोध पद्धत | प्राइमर-प्रोब शोध |
| पीसीआर पद्धत | एक पाऊल RT-qPCR |
| पॉलिमरेज | Taq DNA पॉलिमरेज |
| नमुना प्रकार | डीएनए |
स्टोरेज अटी
उत्पादन कोरड्या बर्फासह पाठवले जाते आणि 1 वर्षासाठी -25~-15℃ वर साठवले जाऊ शकते.ते वारंवार टाळावेफ्रीझ-वितळणे.स्वतंत्रपणे जतन करण्याची शिफारस केली जाते.
सूचना
1.प्रतिक्रिया प्रणाली
| घटक | व्हॉल्यूम (μL) | अंतिम एकाग्रता |
| 2 × MP बफर | १२.५ | 1× |
| एन्झाइम मिक्स | 1 | - |
| प्राइमर/प्रोब मिक्स (2.5 μM) | 3 | 0.3μM |
| टेम्पलेट आरएनए | 1-10 | - |
| RNase मोफत H2O | 25 पर्यंत | - |
टिपा:
वापरण्यापूर्वी चांगले मिसळण्याची खात्री करा, हिंसक कंपनामुळे होणारे जास्त फुगे टाळा.
aप्राइमर एकाग्रता: मल्टीप्लेक्स प्राइमरसह प्राइमर मिक्स, परिस्थितीनुसार इष्टतम प्राइमर एकाग्रता 0.l आणि 1.0μM दरम्यान असू शकते.
bप्रोब एकाग्रता: मल्टीप्लेक्स प्रोब लेबलिंग फरक फ्लोरोसेंट ग्रुपसह प्रोब मिक्स, परिस्थितीनुसार इष्टतम प्रोब एकाग्रता 0.05 आणि 0.5μM दरम्यान असू शकते.
cटेम्पलेट सौम्य करणे: qPCR अत्यंत संवेदनशील आहे आणि टेम्पलेट सौम्य करण्याची शिफारस केली जाते.नियंत्रण Ct मूल्य 20 आणि 35 दरम्यान योग्य आहे.
dसिस्टमची तयारी: कृपया अल्ट्रा क्लीन वर्किंग टेबलमध्ये तयार करा आणि न्यूक्लीज अवशेषांशिवाय पिपेटर आणि प्रतिक्रिया ट्यूब;फिल्टर घटकासह बंदूक हेड वापरण्याची शिफारस केली जाते.क्रॉस दूषित होणे आणि एरोसोल दूषित होणे टाळा.
2. ऑप्टिमाइझ सायकलिंगप्रोटोकॉल
| सायकल पाऊल | टेंप. | वेळ | सायकल |
| उलट प्रतिलेखन | 50℃a | 20 मिनिटे | 1 |
| इनिशियल-डिनेच्युरेशन | 95℃ | ५ मिनिटे | 1 |
| प्रवर्धन प्रतिक्रिया | 95℃ | १५ से |
40-45 |
| 60℃ b | ३०से c |
टिपा:
aउलट प्रतिलेखन: तापमान 42°C किंवा 50°C निवडू शकते.
bॲम्प्लीफिकेशन रिॲक्शन: डिझाइन केलेल्या प्राइमर्सच्या Tm मूल्यानुसार तापमान समायोजित केले जाते.
cफ्लोरोसेन्स सिग्नल संपादन: कृपया इन्स्ट्रुमेंट मॅन्युअलच्या आवश्यकतेनुसार प्रायोगिक प्रक्रिया सेट करा.
नोट्स
तुमचे आरोग्य आणि सुरक्षितता सुनिश्चित करण्यासाठी कृपया आवश्यक PPE जसे की लॅब कोट आणि हातमोजे घाला.
