Rnase अवरोधक (ग्लिसेरॉल मुक्त)
म्युरिन आरनेज इनहिबिटर हा रिकॉम्बिनंट म्युरिन आरनेस इनहिबिटर आहे जो E.coli मधून व्यक्त आणि शुद्ध केला जातो.हे RNase A, B किंवा C ला 1:1 च्या प्रमाणात नॉन-कॉव्हॅलेंट बाँडिंगद्वारे बांधले जाते, ज्यामुळे तीन एन्झाईम्सची क्रिया रोखते आणि RNA चे ऱ्हास होण्यापासून संरक्षण होते.तथापि, हे Aspergillus पासून RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H किंवा RNase विरुद्ध प्रभावी नाही.Murine RNase इनहिबिटरची RT-PCR, RT-qPCR आणि IVT mRNA द्वारे चाचणी केली गेली आणि विविध व्यावसायिक रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस, DNA पॉलिमरेसेस आणि RNA पॉलिमरेसेसशी सुसंगत होती.
मानवी RNase इनहिबिटरच्या तुलनेत, म्युरिन RNase इनहिबिटरमध्ये दोन सिस्टीन नसतात जे ऑक्सिडेशनसाठी अत्यंत संवेदनशील असतात ज्यामुळे इनहिबिटर निष्क्रिय होतात.जे डीटीटीच्या कमी सांद्रतेवर (1 मिमी पेक्षा कमी) स्थिर करते.हे वैशिष्ट्य ते प्रतिक्रियांमध्ये वापरण्यासाठी योग्य बनवते जेथे डीटीटीची उच्च सांद्रता प्रतिक्रियेला प्रतिकूल आहे (उदा. रिअल-टाइम RT-PCR).
Aअर्ज
हे उत्पादन कोणत्याही प्रयोगात मोठ्या प्रमाणावर वापरले जाऊ शकते जेथे RNA ऱ्हास टाळण्यासाठी RNase हस्तक्षेप शक्य आहे, जसे की:
1.प्रथम-स्ट्रँड cDNA संश्लेषण, RT-PCR, RT-qPCR, इ.;
2. इन-व्हिट्रो ट्रान्सक्रिप्शन/अनुवाद (उदा. विट्रोमध्ये व्हायरल प्रतिकृती) मध्ये अधोगतीपासून आरएनएचे संरक्षण करा;
3.आरएनए अलगाव आणि शुद्धीकरण दरम्यान RNase क्रियाकलाप प्रतिबंध.
स्टोरेज अटी
-25～-15℃ वर साठवा;
फ्रीझ-थॉ सायकल ≤ 5 वेळा;
1 वर्षासाठी वैध.
युनिट व्याख्या
RNase A च्या 5 ng च्या क्रियाकलापांना 50% ने प्रतिबंधित करण्यासाठी आवश्यक असलेल्या RNase इनहिबिटरचे प्रमाण म्हणून एक युनिट परिभाषित केले जाते.
आण्विक वजन
RNase इनहिबिटर (Glycerol-free) हे 50 kDa प्रथिन आहे.
गुणवत्ता नियंत्रण
Exonuclease क्रियाकलाप:
1 μg λ-Hind III डायजेस्ट DNA सह 40 U एन्झाइमचे 37°C तापमानात 16 तास उष्मायन केल्याने जेल इलेक्ट्रोफोरेसीसने निर्धारित केल्याप्रमाणे डीएनएचे कोणतेही डिग्रेडेशन झाले नाही.
एंडोन्यूक्लीज क्रियाकलाप:
1 μg λ DNA सह 40 U एंझाइमचे 37°C तापमानात 16 तास उष्मायन केल्याने जेल इलेक्ट्रोफोरेसीसने निर्धारित केल्याप्रमाणे DNA ची कोणतीही ऱ्हास होऊ शकला नाही.
निकिंग क्रियाकलाप:
1 μg pBR322 सह 40 U एन्झाइमचे 16 तास 37° तापमानात उष्मायन केल्याने जेल इलेक्ट्रोफोरेसीसने निर्धारित केल्यानुसार डीएनएचे कोणतेही ऱ्हास होऊ शकला नाही.
RNase क्रियाकलाप:
1.6 μg MS2 RNA सह 40 U एंझाइमचे 37° तापमानात 4 तास उष्मायन केल्याने जेल इलेक्ट्रोफोरेसीसने निर्धारित केल्याप्रमाणे आरएनएचे कोणतेही ऱ्हास होऊ शकले नाही.
E.कोलाय डीएनए:
TaqMan qPCR द्वारे 40 U एन्झाइम आढळले आहे.E.coli DNA ≤ 0. 1pg/40U आहे.
Notes
1. एंजाइम निष्क्रिय होण्यापासून रोखण्यासाठी हिंसकपणे हलवू नका किंवा हलवू नका.
2.RNase इनहिबिटर 25℃ ते 55℃ पर्यंतच्या तापमानात सक्रिय असतो आणि ≥65℃ वर निष्क्रिय होतो.
3. RNase H, RNase 1 आणि RNase T1 ची क्रिया प्रतिबंधित नाही.
4. RNase क्रियाकलाप रोखण्यासाठी pH श्रेणी विस्तृत आहे (pH 5-9 वर सक्रिय), pH 7-8 वर जास्तीत जास्त क्रियाकलाप प्रदर्शित करते.
