व्हायरल डीएनए/आरएनए एक्स्ट्रॅक्शन किट
हे किट नॅसोफॅरिंजियल स्वॅब्स, पर्यावरणीय स्वॅब्स, सेल कल्चर सुपरनॅटंट्स आणि टिश्यू होमोजेनेट सुपरनॅटंट्स यांसारख्या नमुन्यांमधून उच्च-शुद्धतेचे व्हायरल डीएनए/आरएनए जलद काढण्यासाठी योग्य आहे.हे किट सिलिका झिल्ली शुद्धीकरण तंत्रज्ञानावर आधारित आहे जे उच्च गुणवत्तेचे व्हायरल DNA/RNA काढण्यासाठी फिनॉल/क्लोरोफॉर्म सेंद्रिय सॉल्व्हेंट्स किंवा वेळ घेणारे अल्कोहोल पर्जन्य वापरण्याची गरज दूर करते.मिळविलेले न्यूक्लिक ॲसिड अशुद्धतेपासून मुक्त आहेत आणि रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन, पीसीआर, आरटी-पीसीआर, रिअल-टाइम पीसीआर, नेक्स्ट-जनरेशन सिक्वेन्सिंग (एनजीएस) आणि नॉर्दर्न ब्लॉट सारख्या डाउनस्ट्रीम प्रयोगांमध्ये वापरण्यासाठी तयार आहेत.
स्टोरेज परिस्थिती
15 ~ 25 ℃ वर साठवा आणि खोलीच्या तपमानावर वाहतूक करा
घटक
| घटक | 100RXNS |
| बफर VL | 50 मि.ली |
| बफर RW | 120 मि.ली |
| RNase-मुक्त ddH2 O | 6 मिली |
| फास्टप्युअर आरएनए स्तंभ | 100 |
| संकलन नळ्या (2ml) | 100 |
| RNase-मुक्त कलेक्शन ट्यूब्स (1.5ml) | 100 |
बफर VL:लिसिस आणि बाइंडिंगसाठी वातावरण प्रदान करा.
बफर RW:अवशिष्ट प्रथिने आणि इतर अशुद्धी काढून टाका.
RNase-मुक्त ddH2O:स्पिन कॉलममधील पडद्यातून एल्युट डीएनए/आरएनए.
फास्टप्युअर आरएनए स्तंभ:विशेषतः डीएनए/आरएनए शोषून घेतात.
संकलन ट्यूब 2 मिली:फिल्टर गोळा करा.
RNase-मुक्त कलेक्शन ट्यूब्स 1.5 मिली:DNA/RNA गोळा करा.
अर्ज
नासोफरींजियल स्वॅब्स, पर्यावरणीय स्वॅब्स, सेल कल्चर सुपरनॅटंट्स आणि टिश्यू होमोजेनेट सुपरनॅटंट्स.
स्व-तयार मेटरials
RNase-मुक्त विंदुक टिपा, 1.5 ml RNase-मुक्त सेंट्रीफ्यूज ट्यूब, सेंट्रीफ्यूज, व्हर्टेक्स मिक्सर आणि पिपेट्स.
प्रयोग प्रक्रिया
बायोसेफ्टी कॅबिनेटमध्ये खालील सर्व पायऱ्या करा.
1. RNase-मुक्त सेंट्रीफ्यूज ट्यूबमध्ये 200 μl नमुना जोडा (अपुऱ्या नमुन्याच्या बाबतीत PBS किंवा 0.9% NaCl बनवा), 500 μl बफर VL जोडा, 15 - 30 सेकंदांसाठी व्हर्टेक्सिंग करून चांगले मिसळा आणि सेंट्रीफ्यूज करा. ट्यूबच्या तळाशी मिश्रण गोळा करण्यासाठी थोडक्यात.
2. फास्टप्युअर आरएनए कॉलम्स कलेक्शन ट्यूबमध्ये ठेवा 2 मिली.स्टेप 1 पासून फास्टप्युअर आरएनए कॉलम्समध्ये मिश्रण स्थानांतरित करा, 1 मिनिटासाठी 12,000 rpm (13,400 × g) वर सेंट्रीफ्यूज करा आणि फिल्टर टाकून द्या.
3. फास्टप्युअर आरएनए कॉलम्समध्ये 600 μl बफर RW जोडा, 30 सेकंदांसाठी 12,000 rpm (13,400 × g) वर सेंट्रीफ्यूज करा आणि फिल्टर टाकून द्या.
4. पायरी 3 पुन्हा करा.
5. रिकाम्या स्तंभाला 2 मिनिटांसाठी 12,000 rpm (13,400 × g) वर सेंट्रीफ्यूज करा.
6. फास्टप्युअर आरएनए कॉलम्स एका नवीन RNase-मुक्त कलेक्शन ट्यूब्स 1.5 ml (किटमध्ये प्रदान केलेल्या) मध्ये काळजीपूर्वक हस्तांतरित करा आणि स्तंभाला स्पर्श न करता पडद्याच्या मध्यभागी 30 - 50 μl RNase-मुक्त ddH2O जोडा.खोलीच्या तपमानावर 1 मिनिट आणि सेंट्रीफ्यूज 12,000 rpm (13,400 × g) वर 1 मिनिटासाठी उभे राहू द्या.
7. फास्टप्युअर आरएनए स्तंभ टाकून द्या.DNA/RNA नंतरच्या तपासणीसाठी थेट वापरला जाऊ शकतो, किंवा थोड्या काळासाठी -30~ -15°C वर किंवा दीर्घ कालावधीसाठी -85~-65°C वर साठवला जाऊ शकतो.
नोट्स
फक्त संशोधनासाठी वापरा.निदान प्रक्रियेत वापरण्यासाठी नाही.
1. खोलीच्या तापमानाला आगाऊ नमुने समतोल करा.
2. विषाणू अत्यंत संसर्गजन्य असतात.कृपया प्रयोगापूर्वी सर्व आवश्यक सुरक्षा खबरदारी घेतल्याचे सुनिश्चित करा.
3. नमुन्याचे वारंवार गोठणे आणि वितळणे टाळा, कारण यामुळे काढलेल्या विषाणूजन्य DNA/RNA चे उत्पादन कमी होऊ शकते किंवा कमी होऊ शकते.
4. स्वयं-तयार उपकरणांमध्ये RNase-मुक्त विंदुक टिप्स, 1.5 ml RNase-मुक्त सेंट्रीफ्यूज ट्यूब, सेंट्रीफ्यूज, व्हर्टेक्स मिक्सर आणि पिपेट्स समाविष्ट आहेत.
5. किट वापरताना, लॅब कोट, डिस्पोजेबल लेटेक्स ग्लोव्हज आणि डिस्पोजेबल मास्क घाला आणि RNase दूषित होण्याचा धोका कमी करण्यासाठी RNase-मुक्त उपभोग्य वस्तू वापरा.
6. अन्यथा निर्दिष्ट केल्याशिवाय खोलीच्या तपमानावर सर्व चरणे करा.
यंत्रणा आणि कार्यप्रवाह
