वन स्टेप RT-qPCR SYBR ग्रीन प्रीमिक्स
मांजर क्रमांक: HCB5140A
वन स्टेप RT-qPCR सायबर ग्रीन प्रीमिक्स हे SYBR ग्रीन I डाईवर आधारित फ्लोरोसेन्स क्वांटिफिकेशनसाठी आहे.जनुक-विशिष्ट प्राइमर्सचा वापर करून, रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन आणि qPCR प्रतिक्रिया एका ट्यूबमध्ये पूर्ण केल्या जातात, वारंवार कॅप-ओपनिंग आणि पाइपिंग ऑपरेशन्सची आवश्यकता दूर करते, परख कार्यक्षमतेत मोठ्या प्रमाणात सुधारणा होते आणि दूषित होण्याचा धोका कमी होतो.RNA नमुन्यांसाठी, किट कार्यक्षम cDNA संश्लेषणासाठी उष्णता-प्रतिरोधक रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस आणि परिमाणात्मक प्रवर्धनासाठी हॉटस्टार्ट Taq DNA पॉलिमरेझ वापरते.ऑप्टिमाइझ्ड बफर सिस्टीम अंतर्गत, किटची संवेदनशीलता उच्च व्यक्त केलेल्या लक्ष्यांसाठी 0.1 pg आणि मध्यम व्यक्त लक्ष्यांसाठी 1 pg इतकी जास्त असू शकते.किट डीएनए नमुन्यांचे प्रवर्धन आणि प्रमाणीकरणासाठी योग्य आहे.हे वेगवेगळ्या वनस्पती आणि प्राण्यांचे नमुने, पेशी आणि सूक्ष्मजीवांमधून न्यूक्लिक ॲसिडचे संवेदनशील शोध आणि प्रमाणीकरण सक्षम करते.
घटक
No | नाव | खंड | खंड |
1 | प्रगत बफर | 250 μL | 2×1.25 मिली |
2 | प्रगत एन्झाइम मिक्स | 20 μL | 200 μL |
3 | RNase फ्री एच2O | 250 μL | 2×1.25 मिली |
स्टोरेज अटी
हे उत्पादन 1 वर्षासाठी प्रकाशापासून दूर -25~-15℃ वर साठवले पाहिजे.
सूचना
1. प्रतिक्रिया प्रणाली कॉन्फिगरेशनd
घटक | व्हॉल्यूम (μL) | व्हॉल्यूम (μL) | अंतिम एकाग्रता |
प्रगत बफर | १२.५ | 25 | 1× |
प्रगत एन्झाइम मिक्स | 1 | 2 | - |
फॉरवर्ड प्राइमर (10 μmol/L)a | ०.५ | 1 | 0.2 μmol/L |
रिव्हर्स प्राइमर (10 μmol/L)a | ०.५ | 1 | 0.2 μmol/L |
आरएनए टेम्प्लेटb | X | X | - |
RNase फ्री एच2ओc | 25 पर्यंत | 50 पर्यंत | - |
टिपा:
1) अ.टत्याची अंतिम प्राइमर एकाग्रता 0.2 μmol/L होती, जी 0.1 आणि 1μmol/L दरम्यान देखील समायोजित केली जाऊ शकते.
2) बी.अभिकर्मक अत्यंत संवेदनशील आहे, एकूण RNA 1pg-1μg च्या श्रेणीत आहे, आणि मानवी नमुन्यांच्या चाचणीने 1 pg-100 ng चा इष्टतम इनपुट दर्शविला आहे, 15-30 च्या श्रेणीतील एकूण Ct मूल्यासाठी योग्य ते नियंत्रित केले आहे.
3) ग.लक्ष्य जनुक प्रवर्धनाची वैधता आणि पुनरुत्पादनक्षमता सुनिश्चित करण्यासाठी 20μL किंवा 50μL वापरण्याची शिफारस केली जाते.
4) डी.कृपया अल्ट्रा-क्लीन बेंचमध्ये तयार करा आणि न्यूक्लीज अवशेष-मुक्त टिपा आणि प्रतिक्रिया ट्यूब वापरा;फिल्टर काडतुसे असलेल्या टिपांची शिफारस केली जाते.क्रॉस दूषित होणे आणि एरोसोल दूषित होणे टाळा.
2.प्रतिक्रिया कार्यक्रम
सायकल पायरी | टेंप. | वेळ | सायकल |
उलट प्रतिलेखन | 50℃a | 6 मिनिटे | 1 |
प्रारंभिक विकृतीकरण | 95℃ | ५ मिनिटे | 1 |
प्रवर्धन प्रतिक्रिया | 95℃ | १५ से | 40 |
60℃b | ३० से | ||
वितळणे वक्र अवस्था | इन्स्ट्रुमेंट डीफॉल्ट | 1 |
टिपा:
1) अ.रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन तापमान प्रायोगिक गरजांनुसार 50-55°C दरम्यान निवडले जाऊ शकते.डीएनए नमुन्यांसाठी, रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन प्रक्रिया वगळली जाऊ शकते.
2) बी.विशेष प्रकरणांमध्ये ॲनिलिंग/विस्तार तापमान प्राइमर Tm मूल्यानुसार समायोजित केले जाऊ शकते, 60°C शिफारस केली जाते.
नोट्स
1. हे उत्पादन केवळ संशोधन वापरासाठी आहे.
2. कृपया तुमच्या सुरक्षिततेसाठी लॅब कोट आणि डिस्पोजेबल हातमोजे वापरून काम करा.