रानसे ए
Ribonuclease A(RNaseA) हे एकल-स्ट्रँडेड पॉलीपेप्टाइड आहे ज्यामध्ये सुमारे 13.7 kDa च्या आण्विक वजनासह 4 डायसल्फाइड बंध असतात.RNase Ais एक एंडोरिबोन्यूक्लिझ आहे जे विशेषतः C आणि U अवशेषांवर सिंगल-स्ट्रँडेड RNA कमी करते.विशेषत:, क्लीवेज न्यूक्लियोटाइडच्या 5'-राइबोज आणि फॉस्फेट गटाच्या 3'-राइबोजच्या समीप असलेल्या पायरीमिडीन न्यूक्लियोटाइडच्या फॉस्फोडिएस्टर बॉन्डला ओळखते, जेणेकरून 2,3'-सायक्लिक फॉस्फेट हायड्रोलायझिंग होते. 'न्यूक्लिओसाइड फॉस्फेट्स (उदा. pG-pG-pC-pA-pG RNase A द्वारे pG-pG-pCp आणि A-PG तयार करण्यासाठी क्लीव्ह केले जाते).RNase A हे सिंगल-स्ट्रँडेड RNA क्लीव्हिंगमध्ये सर्वात सक्रिय आहे.शिफारस केलेले कार्यरत एकाग्रता 1- 100 μG/mL आहे, विविध प्रतिक्रिया प्रणालींशी सुसंगत आहे.कमी मीठ एकाग्रता (0-100 mM NaCl) चा वापर सिंगल-स्ट्रँडेड RNA, डबल-स्ट्रँडेड RNA आणि RNA-DNA हायब्रिडायझेशनने तयार झालेल्या RNA चेन कापण्यासाठी केला जाऊ शकतो.
तथापि, उच्च मीठ एकाग्रतेवर (≥0.3 M), RNase A केवळ विशेषत: सिंगल-स्ट्रँडेड RNA क्लीव्ह करते.
प्लाझमिड डीएनए किंवा जीनोमिक डीएनए तयार करताना RNA काढण्यासाठी RNase A चा वापर सामान्यतः केला जातो.तयारी प्रक्रियेदरम्यान DNase सक्रिय आहे की नाही हे प्रतिक्रियावर सहज परिणाम करू शकते.पाण्याच्या बाथमध्ये उकळण्याची पारंपारिक पद्धत DNase क्रियाकलाप निष्क्रिय करण्यासाठी वापरली जाऊ शकते.या उत्पादनामध्ये DNase आणि प्रोटीज नसतात आणि वापरण्यापूर्वी उष्णता उपचार आवश्यक नसते.याव्यतिरिक्त, हे उत्पादन RNase संरक्षण विश्लेषण आणि RNA अनुक्रम विश्लेषण यांसारख्या आण्विक जीवशास्त्र प्रयोगांमध्ये देखील वापरले जाऊ शकते.
स्टोरेज परिस्थिती
उत्पादन 2 वर्षांसाठी -25℃~- 15℃ वर साठवले पाहिजे.
तपशील
| देखावा | पावडर |
| प्रमाण | 100mg/1g |
| उत्पादन प्रकार | आरनेस ए |
सूचना
RNase A स्टोरेज सोल्यूशन तयार करण्यासाठी ही एक सामान्य पद्धत आहे.ते देखील तयार केले जाऊ शकतेप्रयोगशाळेतील पारंपारिक पद्धतींनुसार इतर पद्धतींद्वारे किंवा संदर्भ साहित्य (जसे10 mM Tris-HCl, pH 7.5 किंवा Tris-NaCl द्रावणात थेट विरघळणारे)
1. RNase A स्टोरेज सोल्यूशनचे 10 mg/mL तयार करण्यासाठी 10 mM सोडियम एसीटेट (pH 5.2) वापरा.
2. 15 मिनिटांसाठी 100 ℃ वर गरम करणे.
3. खोलीच्या तापमानाला थंड करा, 1 एम ट्रिस-एचसीएल (पीएच 7.4) चे 1/10 व्हॉल्यूम जोडा, त्याचे पीएच 7.4 (साठी) समायोजित कराउदाहरणार्थ, 500 mL 10 mg/mL RNase स्टोरेज सोल्यूशन 1 M Tris-HCl, pH7.4 जोडा.
4. गोठवलेल्या स्टोरेजसाठी -20℃ वर सब-पॅक केलेले, जे 2 वर्षांपर्यंत स्थिर असू शकते.
[नोट्स]:
तटस्थ परिस्थितीत RNaseA द्रावण उकळताना, RNase पर्जन्य तयार होईल;ते कमी पीएचवर उकळवा आणि जर तेथे पर्जन्यवृष्टी असेल तर ते लक्षात घेतले जाऊ शकते, जे प्रथिने अशुद्धतेच्या उपस्थितीमुळे होऊ शकते.उकळल्यानंतर गाळ आढळल्यास, हाय-स्पीड सेंट्रीफ्यूगेशन (13000rpm) द्वारे अशुद्धता काढून टाकली जाऊ शकते आणि नंतर गोठवण्याच्या स्टोरेजसाठी उप-पॅक केली जाऊ शकते.
नोट्स
तुमचे आरोग्य आणि सुरक्षितता सुनिश्चित करण्यासाठी कृपया आवश्यक PPE, जसे की लॅब कोट आणि हातमोजे घाला.
