अल्ट्रा न्यूक्लीज जीएमपी-ग्रेड
मांजर क्रमांक: HC2016A
अल्ट्रान्यूक्लीज जीएमपी-ग्रेड एस्चेरिचिया कोली (ई.कोली) मध्ये जीएमपी वातावरणात अनुवांशिकरित्या अभियंता आणि तयार करून व्यक्त आणि शुद्ध केले जाते.हे वैज्ञानिक संशोधनामध्ये सेल सुपरनॅटंट आणि सेल लाइसेटची चिकटपणा कमी करू शकते, प्रथिने शुद्धीकरण कार्यक्षमता वाढवू शकते आणि प्रोटीन कार्यात्मक संशोधन वाढवू शकते.हे उत्पादन यजमान न्यूक्लिक ॲसिडचे अवशेष pg-ग्रेडमध्ये कमी करू शकते, व्हायरस शुद्धीकरण, लस निर्मिती आणि प्रथिने/पॉलिसॅकेराइड फार्मास्युटिकल उत्पादनासह ऍप्लिकेशन्सच्या जैविक उत्पादनांची कार्यक्षमता आणि सुरक्षितता सुधारते.याशिवाय, सेल थेरपी आणि लस विकासामध्ये मानवी परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर पेशी (PBMC) च्या गुठळ्या रोखण्यासाठी देखील उत्पादन लागू केले जाऊ शकते.
अल्ट्रान्यूक्लीज निर्जंतुकीकृत अभिकर्मकाच्या स्वरूपात प्रदान केले जाते, बफरमध्ये (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% ग्लिसरीन), रंगहीन, पारदर्शक द्रव दिसणे.हे उत्पादन जीएमपी प्रक्रियेच्या आवश्यकतांनुसार तयार केले जाते आणि द्रव स्वरूपात प्रदान केले जाते.
घटक
अल्ट्रान्यूक्लीज GMP-ग्रेड (250 U/μL)
स्टोरेज अटी
उत्पादन कोरड्या बर्फाने पाठवले जाते आणि दोन वर्षांसाठी -25℃~-15°C वर साठवले जाऊ शकते.
जर उत्पादन उघडले असेल आणि एका आठवड्यापेक्षा जास्त काळ 4℃ वर साठवले असेल, तर आम्ही फिल्टर करण्याची शिफारस करतोसूक्ष्मजीव प्रदूषण टाळण्यासाठी उत्पादन.
तपशील
| अभिव्यक्ती होस्ट | अल्ट्रान्यूक्लीज जनुकासह रीकॉम्बीनंट ई. कोलाई |
| आण्विक वजन | 26.5 kDa |
| सोइलेक्ट्रिक पॉइंट | ६.८५ |
| पवित्रता | ≥99% (SDS-PAGE) |
| स्टोरेज बफर | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% ग्लिसरीन |
|
युनिट व्याख्या | एक ॲक्टिव्हिटी युनिट (U) ची व्याख्या वापरल्या जाणाऱ्या एन्झाइमची मात्रा आहेΔA260 चे शोषण मूल्य 30 मिनिटांत 1.0 ने 2. 625 mL मध्ये बदला8.0 च्या pH सह 37℃ वर प्रतिक्रिया प्रणाली (पूर्ण पचन समतुल्यऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्समध्ये 37 μg सॅल्मन शुक्राणू डीएनए). |
सूचना
1. नमुना संकलन
अनुयायी पेशी: माध्यम काढून टाका, PBS सह पेशी धुवा आणि सुपरनॅटंट काढून टाका.
निलंबन पेशी: सेंट्रीफ्यूगेशनद्वारे पेशी गोळा करा, पेशी PBS ने धुवा, 6,000 वर सेंट्रीफ्यूज करा10 मिनिटांसाठी rpm, गोळी गोळा करा.
Escherichia coli: सेंट्रीफ्यूगेशनद्वारे बॅक्टेरिया गोळा करा, PBS सह एकदा धुवा, 8,000 वर सेंट्रीफ्यूज करा5 मिनिटांसाठी rpm, आणि गोळी गोळा करा.
2. नमुना उपचार
गोळा केलेल्या सेल पेलेट्सवर वस्तुमान(g) ते व्हॉल्यूम(mL) 1:(10-20) च्या प्रमाणात लिसिस बफरसह उपचार करा किंवा बर्फावर किंवा खोलीच्या तापमानावर यांत्रिक किंवा रासायनिक पद्धतींनी (1 ग्रॅम सेल पेलेटमध्ये सुमारे
109 पेशी).
3. सजीवांच्या शरीरात निर्मार्ण होणारे द्रव्य उपचार
प्रतिक्रिया प्रणालीमध्ये 1-5mM MgCl जोडा आणि pH 8-9 वर समायोजित करा.
1 ग्रॅम सेल पेलेट्स पचवण्यासाठी 250 युनिट्सच्या गुणोत्तरानुसार अल्ट्रान्यूक्लीज जोडा, 30 मिनिटांपेक्षा जास्त तापमान 37 डिग्री सेल्सियस वर ठेवा.कृपया निवडण्यासाठी "शिफारस केलेली प्रतिक्रिया वेळ" फॉर्म पहाउपचार कालावधी.
4. सुपरनॅटंट संकलन
30 मिनिटांसाठी 12,000 rpm वर अपकेंद्रित करा आणि सुपरनॅटंट गोळा करा.
टीप: जर द्रावण अम्लीय किंवा अल्कधर्मी असेल किंवा त्यात जास्त प्रमाणात मीठ, डिटर्जंट्स किंवाdenaturants, कृपया एंजाइम डोस वाढवा किंवा त्यानुसार उपचार वेळ वाढवा.
शिफारस केलेली प्रतिक्रिया स्थितीons
| पॅरामीटर | इष्टतम स्थिती | प्रभावी कंडिशन |
| Mg²+ एकाग्रता | 1-5 मिमी | 1-10 मिमी |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| तापमान | 37℃ | 0-42℃ |
| डीटीटी एकाग्रता | 0-100 मिमी | >0 मिमी |
| Mercaptoethanol एकाग्रता | 0-100 मिमी | >0 मिमी |
| मोनोव्हॅलेंट केशन एकाग्रता | 0-20 मिमी | 0-150 मिमी |
| फॉस्फेट जास्त एकाग्रता | 0-10 मिमी | 0-100 मिमी |
शिफारस केली प्रतिक्रिया वेळ (३७℃, २ mM Mg²+, pH ८.०)
| अल्ट्रान्यूक्लीज रक्कम (अंतिम एकाग्रता) | प्रतिक्रिया वेळ |
| 0.25 U/mL | > 10 ता |
| 2.5 U/mL | >4 ता |
| 25 U/mL | ३० मि |
टिपा:
तुमचे आरोग्य आणि सुरक्षितता सुनिश्चित करण्यासाठी कृपया आवश्यक PPE, जसे की लॅब कोट आणि हातमोजे घाला!
